Прогрессирование множественной миеломы (ММ) и резистентность к терапии определяются микроокружением костного мозга (BMME). Традиционная одномаркерная иммуногистохимия (ИГХ) не способна разрешить сложные клеточные окружения, внеклеточные сигнальные сети и паттерны пространственного исключения, характерные для этого заболевания. Мультиплексная иммуногистохимия (mIHC) и смежные технологии пространственной визуализации высокой размерности теперь позволяют одновременно визуализировать от 6 до более 60 белковых мишеней на одном FFPE-срезе с сохранением тканевой архитектуры.
Обзор предлагает строгую техническую классификацию mIHC и родственных платформ по модальности детекции: флуоресцентное спектральное разделение/циклическое окрашивание с амплификацией сигнала тирамидом (TSA), циклическая гибридизация с ДНК-штрихкодами, масс-спектрометрическая визуализация металлических изотопов и цифровое пространственное профилирование с региональным фотолизом. Авторы проясняют технические заблуждения: историческую связь между PhenoCycler и Vectra Polaris, циклическую природу Opal/TSA-воркфлоу и истинную химию элюции в CODEX и t-CyCIF.
Представлено расширенное горизонтальное сравнение mIHC с проточной цитометрией, масс-цитометрией (CyTOF), imaging mass cytometry (IMC)/multiplexed ion beam imaging (MIBI) и пространственной транскриптомикой — специфически для костного мозга.
Биологические и клинические применения mIHC организованы вдоль естественного континуума заболевания: моноклональная гаммапатия неопределённого значения (MGUS) → тлеющая миелома (SMM) → впервые диагностированная ММ (NDMM) → посттерапевтическая остаточная болезнь → рецидивирующая/рефрактерная ММ (RRMM) → экстрамедуллярная болезнь (EMD). Интегрированы Т-клеточный, стромальный, миелоидный и NK-клеточный компартменты вместе с цитокиновыми сетями, метаболической конкуренцией и сигналами ремоделирования кости.
Очерчены реализованные парадигмы мультимодальной интеграции: mIHC в сочетании с пространственной транскриптомикой, одноклеточным RNA-секвенированием, цифровым пространственным профилированием и искусственным интеллектом.
Отдельно выделены технические, экономические и рабочие узкие места: спектральное перекрытие, перекрёстная реактивность антител, время выполнения, стоимость и выбор между сгустком костного мозга и декальцинированным трепанобиоптатом. По мере созревания методологических воркфлоу для декальцинированных образцов костного мозга mIHC переходит из исследовательского инструмента в критический компонент прецизионной иммуноонкологии, предлагая практические решения для преодоления CAR-T-резистентности и улучшения стратификации риска.