Дисрегуляция метаболизма холестерина всё чаще рассматривается как драйвер прогрессирования рака желудка, однако роль внутриклеточного транспорта холестерина в ремоделировании межклеточных контактов оставалась неясной. MLN64 (STARD3) — холестерин-связывающий белок семейства липид-переносящих белков START-домена, ассоциированный с прогрессией опухолей. Авторы изучили, связан ли MLN64 с холестерин-зависимой организацией плотных контактов и агрессивным поведением клеток рака желудка.
Стабильный нокдаун MLN64 в линиях AGS и HGC-27 снизил содержание свободного холестерина в мембране: соотношение флуоресценции Filipin III мембрана/цитоплазма уменьшилось примерно на 50% в обеих линиях. Деплеция MLN64 также снизила уровень белка ZO-1, нарушила его локализацию в контактах и целостность плотных контактов: трансэпителиальное сопротивление упало, импеданс изменился, парацеллюлярная проницаемость выросла. Функционально нокдаун MLN64 ослабил пролиферацию и инвазивную способность клеток рака желудка, указывая на связь оси транспорта холестерина с организацией контактов и агрессивным фенотипом.
Для оценки фармакологической доступности пути авторы провели in silico скрининг библиотеки одобренных FDA препаратов и выявили дигоксин и тарегретин (Targretin) как кандидаты, предположительно взаимодействующие со START-доменом MLN64. Дигоксин показал благоприятную предсказанную энергию связывания −13,73 ккал/моль. Функциональная валидация продемонстрировала, что эти агенты фенокопируют эффекты деплеции MLN64: изменяют распределение холестерина, снижают организацию ZO-1 в контактах, нарушают динамику адгезии/миграции и барьерную функцию.
Исследование идентифицирует MLN64 как регулятор холестерин-зависимого ремоделирования плотных контактов в клетках рака желудка. Дигоксин и тарегретин дают предварительные свидетельства фармакологической доступности этого пути, однако для установления причинно-следственной связи и подтверждения прямого взаимодействия с MLN64 потребуются исследования прямого связывания с мишенью и rescue-эксперименты. Ось MLN64–холестерин может представлять потенциальную мишень в мембранной организации и прогрессии рака желудка.