Рак молочной железы распространяется через лимфатическую систему, и сторожевой лимфатический узел (СЛУ) является первой узловой станцией дренирования первичной опухоли. Предыдущие исследования выявили изменения узлового окислительно-восстановительного статуса, связанные со стадией заболевания. В данной работе изучалось, различается ли активность растворимых пептидаз в зависимости от степени вовлечения лимфоузлов, с особым вниманием к СЛУ, содержащим изолированные опухолевые клетки (ITC).

92 СЛУ от женщин с инвазивной карциномой молочной железы классифицировали как негативные (n=77), ITC-позитивные (n=3), с микрометастазами (n=5) или макрометастазами (n=7) с использованием одноэтапной амплификации нуклеиновых кислот (OSNA) для мРНК цитокератина 19 в сочетании с гистологической и иммуногистохимической оценкой. Восемь активностей растворимых пептидаз (APN, APB, OTXase, ASAP, APA, PGPEP1, IRAP и EDA) количественно определяли методом спектрофлуориметрии в гомогенатах узлов.

Ни одна из восьми активностей пептидаз не различалась значимо между категориями узлового вовлечения после коррекции на множественные сравнения (FDR). APA и PGPEP1 показали наименьшие общие p-значения (p=0.068 и p=0.074 соответственно; q=0.295 для обоих). В нескорректированных попарных сравнениях активность APA и PGPEP1 была выше в ITC-позитивных узлах по сравнению с негативными (p=0.038 и p=0.042 соответственно), но эти различия не сохранились после коррекции (q=0.077 и q=0.125 внутри семейства ферментов; q=0.399 для обоих при коррекции на все 48 сравнений).

Оценочные стандартизованные различия были большими, но крайне неточными (Cohen's d=1.47, 95% CI 0.38–3.38 для APA; d=1.49, 95% CI 0.35–3.40 для PGPEP1), а номинальные различия были чувствительны к единственному ITC-позитивному узлу. При сравнении всех вовлечённых узлов с негативными площадь под кривой составила 0.46 для обоих ферментов, и двухферментная логистическая модель не улучшила дискриминацию.

Активность растворимых пептидаз значимо не различалась между категориями узлового вовлечения. Номинально более высокая активность APA и PGPEP1 в ITC-позитивных узлах была эксплораторной, неточной и неустойчивой и не должна интерпретироваться как доказательство особого ферментативного фенотипа, ассоциированного с ITC. Результаты формируют проверяемую гипотезу для будущих исследований и подчёркивают необходимость существенно большего числа ITC-позитивных узлов для её тестирования.