Слияние клеток — физиологический процесс, критически важный для развития и гомеостаза тканей. Однако патологическое слияние клеток ассоциировано с вирусными инфекциями и прогрессией рака. Гибридные раковые клетки, образующиеся при слиянии, могут приобретать новые свойства злокачественности, включая химиорезистентность и повышенный метастатический потенциал, что делает изучение механизмов слияния раковых клеток актуальной задачей.

Для изучения влияния мембранного липида фосфатидилсерина (ФС) и липид-распределяющих белков на слияние клеток использована модель слияния раковых клеток молочной железы на основе dual split protein assay с переэкспрессией фузогена Syncytin-1.

Опухолевые клеточные линии рака молочной железы MDA-MB-231 и HS578T культивировались совместно с эпителиальными клетками молочной железы M13SV1. Для маскировки ФС применялась ФС-связывающий белок Annexin V. Исследована деятельность скрамблазы Ano6/TMEM16F с использованием клинически применяемых веществ (Niclosamide, Clofazimine, Salinomycin, Hexachlorophene). Проведена нокаут Ano6 методом CRISPR/Cas9. Одновременно переэкспрессировались флиппаза Atp8a1 с её кофактором CDC50a. Оценены туморигенные свойства и способность к слиянию модифицированных клеток.

Annexin V статистически значимо снижал опосредованное Syncytin-1 слияние клеток. Однако четыре испытанных вещества (Niclosamide, Clofazimine, Salinomycin, Hexachlorophene) не влияли ни на количество ФС на поверхности клеток, ни на их способность к слиянию. Нокаут Ano6/TMEM16F и переэкспрессия Atp8a1-CDC50a показали слабо выраженные эффекты на слияние клеток.

Хотя большинство эффектов были статистически незначимыми, установлено, что слияние, опосредованное Syncytin-1, снижалось при переэкспрессии Atp8a1-CDC50a в M13SV1 клетках, что предполагает роль снижения ФС в мембране. И наоборот, потеря Ano6 или переэкспрессия Atp8a1-CDC50a в раковых клеточных линиях повышали слияние, опосредованное Syncytin-1. Полученные данные позволяют предположить, что локализация ФС во время слияния может быть динамичной: экстернализованный ФС может усиливать функцию Syncytin-1 на экспрессирующей клетке, тогда как его наличие на соседней клетке способен нарушать слияние.