Терапия ингибиторами JAK2 (JAK2i) является стандартом лечения миелофиброза (МФ). Все одобренные FDA ингибиторы JAK2 относятся к I типу и, обеспечивая симптоматическое облегчение и уменьшение спленомегалии, не способны эффективно элиминировать мутантный клон МПН. Многие пациенты прекращают терапию ингибиторами JAK2 I типа в течение 3-5 лет от начала лечения.

Ингибиторы JAK2 I типа связываются с активной конформацией JAK2, что может приводить к персистенции заболевания из-за продолжающейся активации JAK2 через гетеродимеризацию с JAK1 или TYK2. Ингибиторы JAK2 II типа связываются с неактивной конформацией киназы JAK2 и могут преодолевать резистентность к ингибиторам I типа, что показано в моделях МПН на животных.

AJ1-11095 представляет собой мощный, высокоселективный ингибитор JAK2 II типа для перорального применения — первый препарат данного класса, проходящий многоцентровое клиническое исследование I фазы у пациентов с МФ, рефрактерным к ингибиторам JAK2 I типа (NCT06343805).

Препарат был разработан с использованием мультипараметрической стратегии in silico дизайна и инструментов структурно-ориентированного дизайна лекарств (SBDD). Кокристаллическая структура AJ1-11095, связанного с киназным доменом JAK2, показала связывание в ATP-связывающем кармане с DFG-out конфигурацией активационной петли киназы, что соответствует механизму связывания ингибитора II типа.

Профилирование селективности к киноме выявило высокую селективность к JAK2 по сравнению с другими киназами семейства JAK при минимальном off-target ингибировании. В человеческих клеточных линиях SET2, не получавших руксолитиниб (RUX), наблюдалось мощное подавление сигналинга JAK/STAT (IC50: 45nM). AJ1-11095 эффективно восстанавливал ингибирование сигналинга JAK/STAT в RUX-резистентных клетках SET2 с IC50, аналогичной наивным клеткам.

В Cre-индуцируемой модели конкурентной трансплантации человеческих JAK2VF трансгенных клеток после установления заболевания мыши получали AJ1-11095 (60 мг/кг QD), RUX (60 мг/кг BID) или носитель в течение 56 дней.

AJ1-11095 показал дозозависимые улучшения гематологических показателей:

• Гематокрит: носитель 58%, RUX 50%, AJ1-11095 35% (p<0,0005)
• Объем селезенки (мг): носитель 223, RUX 98, AJ1-11095 57 (p<0,0005)

Проточный анализ выявил значительное снижение мутантной аллельной фракции в периферической крови, селезенке и костном мозге у мышей, получавших AJ1-11095, включая фракцию lin-cKit+Sca1+ (LSK) стволовых клеток костного мозга: носитель 51,5%, RUX 45,6%, AJ1-11095 8,4% (p<0,005).

Значимое снижение мутантной аллельной фракции наблюдалось даже у мышей, предварительно получавших RUX в течение 28 дней с последующими 28 днями терапии AJ1-11095 (LSK 21,9%, p<0,05), что указывает на способность преодолевать резистентность к ингибиторам JAK2 I типа.

В модели адоптивного переноса костного мозга hMPLW515L наблюдались аналогичные улучшения гематологических параметров, а также дополнительное снижение:

• Фиброза костного мозга
• Массы селезенки (мг): носитель 430, RUX 393, AJ1-11095 112 (p<0,005)
• Восстановление архитектуры селезенки

AJ1-11095 значительно снижал уровни про-фибротических цитокинов в сыворотке (TNFα, IL13, IP-10) в большей степени, чем RUX, что указывает на более эффективное ингибирование продукции провоспалительных цитокинов.

В обеих моделях не наблюдалось значительной потери веса, что свидетельствует о том, что AJ1-11095 может усиливать терапевтический эффект без дополнительной токсичности по сравнению с предыдущими ингибиторами JAK2 II типа.

Данные демонстрируют превосходную доклиническую эффективность AJ1-11095 по сравнению с руксолитинибом, включая снижение мутантной аллельной нагрузки и ретикулинового фиброза при улучшенном профиле безопасности. Результаты подтверждают доклиническую полезность и клиническое обоснование применения ингибиторов JAK2 II типа, включая AJ1-11095, для лечения МПН.