Несмотря на улучшение выживаемости при большинстве педиатрических злокачественных новообразований, пациенты с рабдомиосаркомой (RMS) — наиболее частой саркомой мягких тканей у детей — по-прежнему имеют неблагоприятный прогноз. Предыдущие исследования показали высокую чувствительность RMS к воздействию на никотинамидфосфорибозилтрансферазу (NAMPT) — лимитирующий фермент salvage-пути синтеза никотинамидадениндинуклеотида (NAD⁺). В доклинических исследованиях с клиническим ингибитором OT-82 наблюдались полные регрессии опухолей, однако после прекращения терапии развивались рецидивы, что указывает на недостаточность монотерапии.

Для выявления оптимальных комбинированных режимов проведён неспецифичный матричный скрининг 62 противоопухолевых агентов в комбинации с двумя ингибиторами NAMPT (daporinad и GNE-618) на двух линиях клеток RMS: Rh30 (fusion-positive, FP) и Rh36 (fusion-negative, FN). Флоксуридин, пиримидиновый аналог-антиметаболит, показал наиболее выраженную синергию с обоими ингибиторами NAMPT в обеих клеточных линиях.

Валидация результатов в дополнительных линиях FP и FN RMS в пролиферационных анализах подтвердила: комбинация флоксуридина с ингибиторами NAMPT, включая OT-82, приводила к глубокому подавлению пролиферации даже при использовании доз, неэффективных в монотерапии. Критически важно, что при тестировании на пролиферирующих неопухолевых клеточных линиях в тех же дозах комбинация минимально влияла на пролиферацию, что указывает на наличие терапевтического окна.

Проточная цитометрия установила апоптоз как преобладающий механизм клеточной гибели. Добавление никотинамидмононуклеотида (NMN), продукта NAMPT, полностью нивелировало эффект комбинации, демонстрируя NAD⁺-зависимый механизм синергии. Интересно, что ингибирование NAMPT нарушало образование индуцированного флоксуридином тернарного комплекса с тимидилатсинтазой, и этот эффект обращался добавлением NMN.

Для оценки клинической значимости исследовали комбинацию 5-FU (пролекарство флоксуридина, разрешённое для педиатрического применения) и RPT1G (гиперболический ингибитор NAMPT первого класса от Remedy Plan Therapeutics, проходящий ранние фазы клинических исследований). Использование этих клинических агентов воспроизвело первоначальные результаты: низкие дозы каждого препарата, не влиявшие на рост клеток в монотерапии, приводили к стойкому подавлению пролиферации при комбинировании, синергия оставалась NAD⁺-зависимой. Образование тернарного комплекса тимидилатсинтазы также было нарушено при добавлении RPT1G.

В настоящее время проводится пилотное тестирование комбинации 5-FU и RPT1G на ортотопических ксенографтах, результаты будут представлены позднее.

Полученные данные демонстрируют, что пиримидиновые аналоги-антиметаболиты в комбинации с ингибиторами NAMPT представляют собой перспективный и клинически реализуемый режим для детей с рабдомиосаркомой. Механизм синергии основан на NAD⁺-зависимом нарушении метаболизма пиримидинов с индукцией апоптоза, при этом наличие терапевтического окна обеспечивает приемлемый профиль безопасности.