Гетерогенность опухолей и избыточность сигнальных путей ограничивают эффективность моноспецифичных антител при солидных злокачественных новообразованиях. Исследователи использовали платформу гликогуманизированных поликлональных антител (GH-pAb) для изучения возможности одновременного таргетирования нескольких опухоль-ассоциированных антигенов. GH-pAb (обозначены как XON7) получали иммунизацией double-knockout свиней человеческими опухолевыми клетками.
Анализ с использованием микрочипов человеческого протеома и тканевых микрочипов показал опухоль-специфичное связывание XON7 без детектируемого окрашивания нормальных тканей. Профилирование протеома выявило преимущественную реактивность против solute carrier family 3 member 2 (SLC3A2), annexin A2 (ANXA2) и cytoskeleton-associated protein 4 (CKAP4) — широко экспрессируемых поверхностных опухолевых белков.
Эксперименты по иммунодеплеции показали, что для сохранения полной антипролиферативной активности XON7 требуется одновременное таргетирование всех трёх мишеней, что подтверждает мультитаргетный механизм действия. In vitro XON7 индуцировали мощную цитотоксичность через активацию комплемента, апоптоз и антитело-зависимый клеточный фагоцитоз в широкой панели опухолей, включая 2D и 3D культуры. XON7 также индуцировали высвобождение high-mobility group protein box 1 (HMGB1) — маркера иммуногенной клеточной гибели.
In vivo XON7 подавляли рост опухолей в моделях CDX (cell-derived xenograft) и PDX (patient-derived xenograft), а также заметно снижали метастатическую диссеминацию в ортотопических и внутривенных моделях тройного негативного рака молочной железы (TNBC). В модели хориоаллантоисной мембраны куриного эмбриона (CAM) XON7 синергировали с блокадой PD-1, усиливая контроль опухоли и способствуя поляризации макрофагов в сторону M1 фенотипа.
Одновременное воздействие на неизбыточные опухолевые пути и ремоделирование опухолевого микроокружения позволяет XON7 преодолевать ключевые механизмы резистентности солидных опухолей.