Протоковая аденокарцинома поджелудочной железы (PDAC) остается одним из наиболее летальных злокачественных новообразований из-за поздней диагностики, ограниченного ответа на терапию и плотной десмопластической стромы, затрудняющей проникновение препаратов. Исследователи из США разработали и протестировали липосомальную формулу репозиционированного ингибитора факторов транскрипции T-box (TBX2/TBX3) — ключевых драйверов прогрессии PDAC, ответственных за ремоделирование внеклеточного матрикса, инвазию и химиорезистентность.
Биологическое обоснование: Роль TBX2/TBX3 изучалась в линиях клеток PDAC человека с использованием SA-β-gal-анализа, окрашивания Annexin-V/PI, трансвелл-инвазии, иммуноцитохимии и вестерн-блоттинга. При стабильном нокдауне TBX3 клетки переходили в сенесценцию с редуцированной пролиферацией, при этом уровни TBX2 компенсаторно возрастали. Деплеция TBX2 в TBX3-нокдаун клетках подавляла миграцию и инвазию, демонстрируя различные онкогенные функции TBX2 и TBX3 и необходимость двойного ингибирования.
Скрининг и характеристика препарата: Ведущее соединение (название не разглашено до регистрации интеллектуальной собственности) отобрано в высокопроизводительном скрининге репозиционированных препаратов. Цитотоксичность оценивалась MTT-анализом в линиях PDAC (PANC-1, BxPC-3) и нормальных эпителиальных/стромальных клетках (HPNE, HPaSteC).
Моделирование микроокружения: Для имитации десмопластического микроокружения опухоли создавали 3D-сфероиды из кокультуры клеток PANC-1 и панкреатических стеллатных клеток (HPaSteC). Изменения после лечения количественно оценивались с помощью SpheroidSizer®.
Липосомальная формула: Получена методом кросс-потокового смешивания с использованием гидрогенизированного соевого фосфатидилхолина, холестерина и вспомогательных липидов. Охарактеризованы размер частиц, индекс полидисперсности (PdI) и эффективность инкапсуляции (EE).
Проникновение в десмопластическую ткань: В 3D-моделях первичная экспозиция препарата приводила к ограниченному проникновению с повреждением преимущественно наружных слоев и их последующим «луковичным» отслоением. Повторные введения обеспечивали более глубокое проникновение и полное разрушение ядра сфероида при более высоких концентрациях.
Селективная цитотоксичность: Препарат демонстрировал выраженную цитотоксичность против клеток PDAC при сохранении нормальных эпителиальных и стромальных клеток.
Репозиционированный ингибитор TBX2/TBX3 показал:
- Сильную цитотоксичность против клеток PDAC
- Эффективное разрушение десмопластических 3D-сфероидов при повторном дозировании
- Успешную разработку липосомальной формулы с оптимизированными фармакокинетическими характеристиками
Полученные данные обосновывают дальнейшую оценку препарата, особенно в комбинации с другими химиотерапевтическими агентами, для лечения PDAC. Стратегия репозиционирования существующих соединений обеспечивает более быстрый трансляционный путь при таргетном воздействии на ключевую транскрипционную программу, лежащую в основе десмоплазии при PDAC.