Осимертиниб — ингибитор EGFR третьего поколения, необратимо связывающийся с рецептором и активный в отношении частых активирующих мутаций EGFR (ex19del и L858R), а также резистентной мутации T790M. Клиническая резистентность к осимертинибу часто возникает через появление мутации EGFR C797S, что стимулировало разработку ингибиторов EGFR четвертого поколения.
Исследователи провели сравнительное биохимическое и клеточное профилирование осимертиниба и трех ингибиторов четвертого поколения: BLU-945, JBJ-09-063 и silevertinib. Киназные анализы выполнялись как при Km,ATP, так и при физиологической концентрации АТФ (1 ммоль/л). Влияние на жизнеспособность клеток оценивалось на CRISPR-модифицированной линии NCI-H1975 с мутациями L858R + T790M + C797S и на панели из 113 раковых клеточных линий, включая десять EGFR-мутантных линий с мутациями, отличными от C797S.
Биохимические анализы выявили существенные различия в профилях ингибиторов четвертого поколения против различных вариантов EGFR при разных концентрациях АТФ.
BLU-945 оказался единственным ингибитором, демонстрирующим широкую активность против активирующих вариантов EGFR как с мутациями резистентности T790M и/или C797S, так и без них.
JBJ-09-063 селективно ингибировал мутанты с L858R и сохранял схожую активность при различных концентрациях АТФ, что согласуется с аллостерическим, АТФ-независимым механизмом действия. В экспериментах с поверхностным плазмонным резонансом JBJ-09-063 связывался с EGFR L858R + T790M даже после насыщения осимертинибом, подтверждая неперекрывающиеся сайты связывания.
Silevertinib продемонстрировал высокую активность против активирующих мутаций EGFR с мутацией C797S или без нее, но заметно сниженную активность при наличии мутации T790M.
Все ингибиторы четвертого поколения сохраняли способность связываться с мутантами C797S в экспериментах с поверхностным плазмонным резонансом.
В модели клеточной линии NCI-H1975 L858R + T790M + C797S JBJ-09-063 показал наивысшую активность среди тестируемых ингибиторов.
На широкой панели клеточных линий silevertinib продемонстрировал наибольшую мутант-селективную активность с >200-кратной селективностью в отношении EGFR-мутантных клеток по сравнению с клетками с диким типом EGFR, превосходя осимертиниб по этому показателю.
Сравнительный анализ подчеркивает существенные различия в ландшафтах активности ингибиторов EGFR четвертого поколения. Полученные данные могут направлять оптимальное применение этих ингибиторов в различных клинических контекстах:
- BLU-945 может быть предпочтителен при необходимости широкого охвата различных комбинаций мутаций EGFR