Клеточные линии рака щитовидной железы TPC-1 и IHH4 трансфицировали siRNA, специфичной к GINS4 (Go-Ichi-Ni-San complex subunit 4). Для подтверждения роли ферроптоза использовали ferrostatin-1 (Ferr-1), для валидации p53-зависимого пути — pifithrin-α (PFT-α). Анализ белок-белковых взаимодействий (PPI) выполнен для выявления связей GINS4 с маркерами ферроптоза.

Нокдаун GINS4 индуцировал ферроптоз в клетках рака щитовидной железы: повышение уровней активных форм кислорода (ROS), малонового диальдегида (MDA) и Fe2+, снижение митохондриального мембранного потенциала (MMP). Добавление Ferr-1 нивелировало эффекты нокдауна GINS4, подтверждая, что гибель клеток обусловлена именно ферроптозом.

PPI-анализ идентифицировал p53 как потенциальную центральную молекулу в сети GINS4-ассоциированного ферроптоза, с SLC7A11 и GPX4 в качестве ключевых нижележащих белков. Вестерн-блот подтвердил, что нокдаун GINS4 повышал экспрессию p53 и снижал SLC7A11 и GPX4. PFT-α (ингибитор p53) обращал эффекты нокдауна GINS4 на путь p53/SLC7A11/GPX4 и ферроптоз, указывая на вклад этой оси в GINS4-опосредованный ферроптоз.

Подавление экспрессии GINS4 усиливает ферроптоз в клетках рака щитовидной железы через путь p53/SLC7A11/GPX4, что может иметь значение для разработки терапевтических стратегий.