γδT-лимфоциты сочетают черты врожденного и адаптивного иммунитета, что делает их перспективными для иммунотерапии опухолей. Однако их низкая численность в периферической крови (1–5% всех лимфоцитов) и функциональная гетерогенность требуют разработки эффективных методов выделения и размножения in vitro.

Иммуномагнитная и флуоресцентно активируемая сортировки клеток позволяют получить чистые популяции γδT-клеток до 90–98%. Эти подходы обеспечивают селективное выделение различных субпопуляций для последующего культивирования.

Наиболее разработаны методы селективной экспансии Vγ9Vδ2-T-клеток с использованием фосфоантигенов: их доля в культуре достигает >90% уже через 10–14 дней. Стимуляция антителами к CD3, CD28 и γδT-клеточному рецептору, а также использование искусственных антигенпрезентирующих клеток на основе линии K562 обеспечивают длительную пролиферацию (до нескольких недель) и многократную экспансию (в сотни тысяч раз), что делает эти методы пригодными для клинического применения.

Методы размножения редких субпопуляций (Vδ1+, Vδ3+) и клеток животных остаются малоизученными. Длительное культивирование может приводить к фенотипическому истощению клеток, что требует оптимизации протоколов для сохранения функциональной активности.

Перспективными направлениями являются генная инженерия (CAR-γδT-клетки) и совершенствование условий культивирования, включая подбор цитокиновых комбинаций и новых стимулирующих молекул, для расширения терапевтического потенциала γδT-лимфоцитов в онкологии.