Медуллобластома (МБ) — наиболее частая эмбриональная опухоль головного мозга у детей с 30% частотой рецидивов, при этом рецидивирующие формы остаются практически инкурабельными. Блокада иммунных контрольных точек (immune checkpoint inhibition, ICI) рассматривается как альтернативная стратегия, однако клинические испытания в МБ единичны, а одобренные FDA ингибиторы контрольных точек показывают низкую эффективность в «холодном» опухолевом микроокружении (tumor microenvironment, TME), характерном для МБ: низкая экспрессия мишеней для ICI, скудная инфильтрация Т-лимфоцитами, обилие опухоль-ассоциированных макрофагов/микроглии (tumor-associated macrophages/microglia, TAMs).
B7-H3 (CD276) — молекула иммунного чекпоинта с низкой экспрессией в нормальных тканях и высокой — во многих опухолях, включая МБ. Экспрессия B7-H3 коррелирует с неблагоприятным прогнозом при МБ, но механизм, посредством которого опухолевый B7-H3 формирует иммуносупрессивное TME, оставался неясным. В других опухолях показана способность опухолевого B7-H3 поляризовать TAMs. Авторы предположили, что опухолевый B7-H3 смещает TAMs в медуллобластоме в иммуносупрессивное состояние, что приводит к дисфункции и исключению Т-клеток.
Для изучения влияния опухолевого B7-H3 на TME использовали сингенную мышиную линию агрессивной МБ, имплантируемую мышам с интактной иммунной системой. С помощью CRISPR/Cas9-лентивируса создали нокаут B7-H3 и отсортировали гетерогенную популяцию в B7-H3+ и B7-H3KO клоны. Клоны имплантировали в мозжечок мышей C57BL/6J, оценивали выживаемость и анализировали TME методами иммуногистохимии и проточной цитометрии. Также проводили кокультуры опухолевых клеток с макрофагами и Т-клетками для определения эффекта экспрессии опухолевого B7-H3 на отдельные популяции иммунных клеток.
Мыши с имплантированными B7-H3KO опухолями (N=15) продемонстрировали значимо увеличенную выживаемость по сравнению с мышами, несущими B7-H3+ опухоли (N=14; p<0.0001). Предварительные данные указывают на повышенную инфильтрацию CD8+ Т-клеток в опухолях у мышей с B7-H3KO.
При кокультивировании с опухолевыми клетками макрофаги демонстрировали экспрессию иммуносупрессивных маркеров Arg1 и CD206, однако значимо меньше макрофагов, кокультивированных с B7-H3KO клетками, экспрессировали иммуносупрессивные маркеры по сравнению с макрофагами, культивированными с B7-H3+ опухолями.
Предварительные данные свидетельствуют, что ингибирование B7-H3 может трансформировать «холодное» TME (с малым числом Т-клеток и иммуносупрессивными TAMs) в «горячее» с большим числом цитотоксических Т-клеток, сниженным содержанием иммуносупрессивных TAMs и увеличенной выживаемостью.
Ингибирование B7-H3 может изменить перспективы применения Т-клеточно-ориентированных ICI, таких как блокада PD-1, при медуллобластоме. Эти находки способны полностью изменить течение заболевания у пациентов, обеспечивая куративный подход при рецидивирующих формах. Исследование представляет ключевой шаг в разработке терапевтических подходов для лечения иммуносупрессированных опухолей.