Диффузная В-крупноклеточная лимфома (ДВКЛ) — высоко гетерогенное злокачественное новообразование, клиническое значение экспрессии PD-L1 при котором остается не до конца изученным. Авторы оценили экспрессию PD-L1 методом иммуногистохимии у 72 пациентов с ДВКЛ и в 12 образцах реактивной гиперплазии лимфоузлов (контроль), с последующим анализом выживаемости. Позитивность по PD-L1 составила 69,4% и была значимо ассоциирована с худшей общей выживаемостью.

Для углубленного молекулярного анализа были отобраны по три репрезентативных образца из каждой группы (PD-L1-позитивная ДВКЛ, PD-L1-негативная ДВКЛ и реактивная гиперплазия) для количественной протеомики и фосфопротеомики методом data-independent acquisition (DIA).

Интегрированный протеомный и фосфопротеомный анализ показал, что CARD11 был единственным белком, уровень которого повышался у PD-L1-позитивных пациентов одновременно на уровне белковой экспрессии и фосфорилирования по сравнению с PD-L1-негативной группой.

Анализ обогащения киназа-субстрат (KSEA) и построение сети киназа-субстрат выявили значимые различия в экспрессии IKBKB между PD-L1-позитивной и PD-L1-негативной группами и идентифицировали CARD11 S515 как потенциальный сайт фосфорилирования, находящийся downstream от IKBKB. GSEA дополнительно показал, что сигнальный путь NF-κB был значимо обогащен в PD-L1-позитивной группе как на уровне белкового профиля, так и на уровне фосфорилирования.

Валидация на клеточных линиях ДВКЛ методами qRT-PCR и Western blotting подтвердила, что IKBKB, фосфорилированный CARD11, фосфорилированный P65 и PD-L1 одновременно повышены в клетках ДВКЛ. Функциональные эксперименты с knockdown CARD11 или ингибированием IKBKB с помощью PS-1145 продемонстрировали снижение активности NF-κB-пути и экспрессии PD-L1.

Полученные данные свидетельствуют, что регуляторная ось IKBKB–CARD11–NF-κB–PD-L1 может быть вовлечена в механизмы иммунного ускользания и неблагоприятного прогноза при PD-L1-позитивной ДВКЛ. Эта ось предоставляет омиксные доказательства для прогностической стратификации на основе PD-L1 и потенциальных стратегий комбинированной таргетной и иммунотерапии.